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Resumen

The present invention relates to a method for detecting marked structures, to its uses and to a device designed to carry out the method.

Reivindicaciones

REIVINDICACIONES 1. Un método de detección de estructuras marcadas que comprende las etapas de: i) proporcionar: - una estructura marcada con un marcador luminiscente, donde dicho marcador luminiscente presenta un espectro de absorción; - al menos una nanopartícula luminiscente (PL), donde dicha al menos una PL presenta un espectro de emisión; donde dicho espectro de emisión de dicha al menos una PL se solapa con el espectro de absorción del marcador luminiscente de la etapa (i); - una pinza óptica, donde dicha pinza óptica comprende un láser focalizado; donde dicho láser focalizado presenta una emisión en un rango de longitudes de onda que no se solapa con el espectro de absorción del marcador luminiscente de la etapa (i); ii) confinar y simultáneamente excitar dicha al menos una PL de la etapa (i) mediante la pinza óptica de la etapa (i) dando lugar a al menos una PL excitada y confinada; iii) opcionalmente desplazar la al menos una PL excitada y confinada de la etapa (ii) mediante la pinza óptica de la etapa (i); y iv) excitar el marcador luminiscente de la etapa (i) mediante la radiación emitida por dicha al menos una PL excitada y confinada de la etapa (ii) o (iii), dando lugar al marcador luminiscente excitado; donde dicho marcador luminiscente excitado emite una señal luminiscente. 2. El método de detección según la reivindicación 1 , donde dicho marcador luminiscente se selecciona entre fluoróforos, cromóforos y combinaciones de los anteriores. 3. El método de detección según cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, donde dicha al menos una PL se encuentra encapsulada en una matriz. 4. El método de detección según cualquiera de las reivindicaciones 1-3, donde dicha al menos una PL esta funcionalizada. 5. El método de detección según cualquiera de las reivindicaciones 1-4, donde dicha al menos una PL es al menos un punto cuántico (PC). 6. El método de detección según cualquiera de las reivindicaciones 1-5, donde el un láser focalizado de la etapa (i) presenta una emisión en un rango de longitudes de onda comprendidas entre 650-950 nm que excita a dicha al menos una PL. 7. El método de detección según cualquiera de las reivindicaciones 1-6, donde la excitación de la al menos una PL de la etapa (ii) se produce mediante un mecanismo de absorción de dos fotones. 8. El método de detección según cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en donde las etapas (iii) y (iv) se repiten al menos una vez. 9. El método de detección según cualquiera de las reivindicaciones 1-8, donde dicha al menos una PL confinada y excitada de la etapa (ii) emite luminiscencia; preferiblemente radiación en un rango de longitudes de onda entre 400 y 650 nm. 10. El método de detección según cualquiera de las reivindicaciones 1-9, donde la señal producida por el marcador luminiscente excitado de la etapa (iv) es una emisión luminiscente; preferiblemente fluorescente en el rango de entre 400 y 700 nm. 11. El método de detección según cualquiera de las reivindicaciones 1-10, donde la señal luminiscente de la etapa (iv) se detecta mediante un espectrómetro. 12. El método de detección según cualquiera de las reivindicaciones 1-11 , donde dicha estructura marcada de la etapa (i) está presente en especímenes biológicos y no biológicos. 13. El método de detección según cualquiera de las reivindicaciones 1-12, donde dicho método se aplica en muestras biológicas. 14. El método de detección según la reivindicación 13, donde dicho método se aplica para mapear membranas celulares, biosensar proteínas de membrana o monitorizar señales eléctricas. 15. Uso de un marcador luminiscente en el método de detección de estructuras marcadas según cualquiera de las reivindicaciones 1-14. 16. Uso de una partícula luminiscente (PL) en el método de detección de estructuras marcadas según cualquiera de las reivindicaciones 1-14. 17. Uso de una pinza óptica en el método de detección de estructuras marcadas según cualquiera de las reivindicaciones 1-14. 18. Aparato diseñado para llevar a cabo el método de detección de estructuras marcadas según cualquiera de las reivindicaciones 1-14 que comprende: i) medios para atrapar y rotar la estructura marcada de la etapa (i); ii) la pinza óptica de la etapa (i) del método de detección de estructuras marcadas según cualquiera de las reivindicaciones 1-14; y iii) un detector de la señal de la etapa (iv) del método de detección de estructuras marcadas según cualquiera de las reivindicaciones 1-14.

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