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Set of microgel particles containing immobilised glucose oxidase consists of a glucose amperometric biosensor with a silver chloride reference electrodeCM Patents

Índice de la ficha

Updated at
24/07/2026
Numero publicacion
ES.2246135.A1
Fecha publicacion
01/02/2006
Numero solicitud
ES20040000816
Fecha presentacion
02/04/2004

En detalle

Resumen

The set of microgel particles containing immobilised glucose oxidase comprises a glucose amperometric biosensor made as a platinum electrode with acrylic and acrylamide based microgels immobilising the enzymatic laye rof glucose oxidase. Also claimed is a process using the particles. The process employs a platinum auxiliary electrode and a silver chloride reference electrode at +0.6 volts. The current obtained is directly related to the sample's glucose content.

Reivindicaciones

1. 1. Partículas de microgel polimérico con enzimainmovilizada en su interior, caracterizadas porque contienenpoliacrilamida y poli (ácido acrílico) en proporción 1:1, agenteentrecruzanteNN'-metilen-bisacrilamida al 3, 25% yen cuyo interior se ha inmovilizado la enzima glucosa oxidasa. 2. 2. Partículas de microgel polimérico con enzimainmovilizada en su interior, según reivindicación 1, caracterizadas por poseer forma esférica y tamaños entre 0, 5μm y 12 μm. 3. 3. Método de obtención de partículas de microgelpolimérico con enzima inmovilizada en su interior descritas en lasreivindicaciones 1 y 2, caracterizado porque comprende lassiguientes etapas: (1) preparación de una emulsión concentradaacuosa/oleosa que contiene la enzima glucosa oxidasa, (2) polimerización de la emulsión concentrada, (3) recuperación delproducto y (4) conservación de las partículas de microgel. 4. 4. Método de obtención de partículas de microgelpolimérico con enzima inmovilizada en su interior, segúnreivindicación 3, caracterizado porque la fase oleosa estáformado por una mezcla de dodecano (75%v/v) y Span80 (25% v/v) . 5. 5. Método de obtención de partículas de microgelpolimérico con enzima inmovilizada en su interior, segúnreivindicación 3, caracterizado porque la fase acuosacontiene acrilamida 1, 75 M, ácido acrílico 1, 75 M, NN'-metilen-bisacrilamida 3, 25%, disolución tampón fosfato 0, 05M, pH 7, 2 y enzima glucosa oxidasa encantidades comprendidas entre 10 y 100mg-mL- 1. 6. 6. Método de obtención de partículas de microgelpolimérico con enzima inmovilizada en su interior, segúnreivindicaciones 3, 4 y 5, caracterizado porque lapreparación de la emulsión concentrada acuosa/oleosa se realizainyectando la fase acuosa gota a gota sobre la fase oleosa. 7. 7. Método de obtención de partículas de microgelpolimérico con enzima inmovilizada en su interior, segúnreivindicación 3, 4, 5 y 6, caracterizado porque utiliza unaemulsión concentrada acuosa/oleosa que contiene un 13, 89% de faseoleosa y un 86, 11% de fase acuosa. 8. 8. Método de obtención de partículas de microgelpolimérico con enzima inmovilizada en su interior, segúnreivindicación 3, caracterizado porque la polimerización serealiza utilizando como catalizadorNNN'-trimetil-etilen-diamina (1, 25% v/v) y controlando al temperatura para evitar ladesnaturalización de la enzima. 9. 9. Método de obtención de partículas de microgelpolimérico con enzima inmovilizada en su interior, segúnreivindicación 3, caracterizado porque la recuperación delproducto se realiza mediante la separación de fases porcentrifugación. 10. 10. Método de obtención de partículas de microgelpolimérico con enzima inmovilizada en su interior, segúnreivindicación 3, caracterizado porque las partículas seliofilizan antes de conservarse en cámara frigorífica. 11. 11. Uso de las partículas de microgel poliméricocon enzima inmovilizada en su interior descritas en lasreivindicaciones 1 y 2, como biosensor de glucosa. 12. 12. Uso de partículas de microgel polimérico conenzima inmovilizada en su interior, según reivindicación 11, dondeel biosensor consta de un electrodo de disco de platino comotransductor. 13. 13. Uso de partículas de microgel polimérico conenzima inmovilizada en su interior, según reivindicaciones 11 y 12, donde el biosensor discrimina la señal de glucosa de la del ácidoúrico por poseer las partículas carga superficial negativa. 14. 14. Uso de partículas de microgel polimérico conenzima inmovilizada en su interior, según reivindicaciones 11 y 12, donde el biosensor discrimina la señal de glucosa de la del ácidoascórbico por poseer las partículas carga superficial negativa.

Etiquetas

Inventores
Lopez Ruiz BeatrizLopez Cabarcos Enrique JoseRubio Retama Benito Jorge
Solicitantes
Universidad Complutense de Madrid
Clasificacion ipc
C12N 11/ 04 A IG01N 27/ 30 A I
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