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Procedure for immobilization of a glutamate dehydrogenase. (Machine-translation by Google Translate, not legally binding)CM Patents

Índice de la ficha

Updated at
24/07/2026
Numero publicacion
ES.2325802.A2
Fecha publicacion
17/09/2009
Numero solicitud
ES20070002294
Fecha presentacion
16/08/2007

En detalle

Resumen

Procedure of immobilization of a glutamate dehydrogenase. This application describes the preparation of a stabilized immobilized thermus spp. Glutamate dehydrogenase (gdh) derivative by multi-point covalent binding. The soluble enzyme is already very stable from ph 6 to ph 10, even at 60º c, it recognizes nad, nadh, nadp, and nadph. Its immobilization in glyoxal supports allows the stabilization of both its multimeric structure and the rigidity of each monomer, further increasing its thermoresistance, and extending the range of use to ph below 5 (where the soluble enzyme is inactivated by dissociation). The immobilized derivative is resistant to solvents, high temperature, drastic ph, etc. This immobilized derivative of the gdh, therefore, would have excellent possibilities of use as a cofactor regenerative enzyme in enzymatic reduction-oxidation processes or as a biosensor. (Machine-translation by Google Translate, not legally binding)

Reivindicaciones

1. 1. Procedimiento de inmovilización de unaglutamato deshidrogenasa de Thermus thermophiluscaracterizado porque la enzima se estabiliza por unióncovalente multipuntual y multi-subunidades sobresoportes activados con grupos glioxil y porque comprende lassiguientes etapas: 2. i) 3. ii) 4. iii) 5. 2. Procedimiento según reivindicación 1 en elque el soporte es agarosa, vidrio poroso o soportes de basesilícea. 6. 3. Procedimiento según las reivindicaciones 1 y2 en el que la inmovilización y la incubación se realizan entrepH 9.5 y 11. 7. 4. Procedimiento según las reivindicacionesanteriores en el que la enzima se deja reaccionar con el soporteentre 1 h y 24 h. 8. 5. Procedimiento según las reivindicacionesanteriores en el que la temperatura de inmovilización y deincubación está entre 4ºC y 50ºC. 9. 6. Procedimiento según las reivindicacionesanteriores en el que el agente reductor de aldehído es elborohidruro sódico. 10. 7. Procedimiento según las reivindicaciones 1 a6 caracterizado porque la glutamato deshidrogenasainmovilizada-estabilizada presenta actividad tantocon NAD (H) como con NADP (H) y se utiliza en laregeneración de cofactores oxidados o reducidos. 11. 8. Procedimiento según la reivindicación 7 en elque la enzima inmovilizada-estabilizada finalmentese utiliza para regenerar NAD. 12. 9. Procedimiento según la reivindicación 7 en elque la enzima inmovilizada-estabilizada se utilizapara regenerar NADH. 13. 10. Procedimiento según la reivindicación 7 enel que la enzima inmovilizada-estabilizada seutiliza para regenerar NADP. 14. 11. Procedimiento según la reivindicación 7 enel que la enzima inmovilizada-estabilizada seutiliza para regenerar NADPH. 15. 12. Procedimiento según las reivindicaciones1-6 en el que la preparación enzimática se atrapaen sol-geles u otros polímeros para depositar en elsensor de biosensores (por ej. de ácido glutámico, metales pesados, amoniaco, urea, etc) . 16. 13. Un biocatalizador de Glutamatodeshidrogenasa de Thermus thermophilusinmovilizada-estabilizada por el procedimientosegún las reivindicaciones 1 a 12. 17. 14. Uso de una glutamato deshidrogenasa deThermus thermophilus, inmovilizada-estabilizada según las reivindicaciones1 a 12, como enzima regeneradora de cofactores en procesos dereducción-oxidación enzimáticos. 18. 15. Uso de una glutamato deshidrogenasa deThermus thermophilus, inmovilizada-estabilizada según lasreivindicaciones 1 a 12, como biosensor, por ej. de ácidoglutámico, metales pesados, amoniaco, urea, etc...

Etiquetas

Inventores
Bolivar Bolivar Juan ManuelMateo Gonzalez CesarRocha Martin JavierFernandez Lafuente RobertoGuisan Seijas Jose ManuelCava Valenciano Felipe
Solicitantes
Consejo Superior de Investigaciones CientíficasUniv Autonoma de Madrid TitulaUniversidad Autónoma de MadridConsejo Superior de Investigaciones Cientificas (Titular AlUniversidad Autonoma de Madrid (Titular AlConsejo Superior de Investigaciones Cientificas (T
Clasificacion ipc
C12N 11/ 10 A IC12N 11/ 14 A IC12N 9/ 06 A I
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