madrid2i

Resumen

Method to obtain neural stem cells and neural progenitor cells from non-embryonic ovarian cortical tissue. The present invention relates to a method for obtaining neural stem cells and neural progenitor cells (ctn/cpn) from ovarian cortical tissue of mammalian prepubertal females, without the need to add induction and/or expansion factors to the culture medium. Neural lineage. With the method of the invention ctn/cpn are obtained after 6-21 days of incubation, improving the results by adding fsh to the culture medium. The ctn/cpn obtained by this method can be used in experimental models of in vitro neurogenesis, in targeted differentiation of ctn/cpn to generate various types of nerve cells of interest in regenerative medicine of the nervous system, with application to autologous transplantation in cellular therapy of neurodegenerative pathologies, as well as for the evaluation of neurotoxicity of various drugs, contaminants and chemical compounds. (Machine-translation by Google Translate, not legally binding)

Reivindicaciones

1. REIVINDICACIONES 2. 1. Método para obtener células troncales neurales y células progenitoras neurales (CTN/CPN) a partir de muestras de tejido cortical ovárico posnatal/prepúber que incluye los siguientes pasos: 5 3. a) fragmentar una muestra de tejido cortical ovárico posnatal/prepúber hasta obtener fragmentos de dimensiones iguales o menores a 1,0 x 1,0 mm; 4. b) digerir enzimáticamente los fragmentos de tejido cortical ovárico del paso a); 10 5. c) disgregar mecánicamente los fragmentos digeridos del paso b); 6. d) eliminar los folículos ováricos preantrales y los oocitos de los fragmentos disgregados del paso 15 7. e), por filtración; e) incubar las células obtenidas mediante los pasos a) - d) durante 6-21 días en placas tapizadas con fibronectina y en medio de cultivo completo, que incluye medio esencial o de mantenimiento libre de suero, suplementado con albúmina sérica bovina, insulina, transferrina, selenio y colesterol, 20 8. donde no se incluyen factores de inducción y/o expansión del linaje neural. 9. 2. Método según reivindicación 1 en el que el medio de cultivo del paso e) incluye hormona folículo-estimulante (FSH). 25 10. 3. Método según reivindicación 2 en el que la concentración de FSH es de 50 ng/ml de medio de cultivo. 11. 4. Método según cualquiera de las reivindicaciones anteriores en el que el medio de 30 cultivo del paso e) incluye tampón HEPES, antibióticos y/o antimicóticos. 12. 5. Método según cualquiera de las reivindicaciones anteriores en el que la incubación del paso e) se mantiene durante 6 días. 13. 35 14. 6. Método según cualquiera de las reivindicaciones anteriores en el que las muestras de tejido cortical ovárico proceden de un mamífero. 15. 7. Método según la reivindicación 6 en el que el mamífero es de la especie ovina. 16. 40 17. 8. Método según la reivindicación 6 en el que el mamífero es de la especie humana. 18. 45

Índice de la ficha

En detalle

Resumen

Reivindicaciones

Etiquetas