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Tool for capturing integron cassettes (Machine-translation by Google Translate, not legally binding)CM Patents

Índice de la ficha

Updated at
24/07/2026
Numero publicacion
WO.2025238278.A1
Fecha publicacion
20/11/2025
Numero solicitud
WO2025ES70256
Fecha presentacion
07/05/2025

En detalle

Resumen

Tool for capturing integron cassettes. The invention relates to a tool for capturing integron cassettes that includes the gene for a counterselective marker into which an integration site (attl) has been inserted to convert it into a blind reading marker for selecting recombination events. The tool also includes the integrase intl gene. The construct of the counterselective marker with the attl site can be integrated into the chromosome of a bacterium, especially a strain of Vibrio cholera lacking a superintegron, while the intl gene is included in a plasmid into which, in addition, the tfoX gene, regulator of the natural competence of V. cholerae, can be inserted. The invention also relates to methods and kits for detecting integron cassettes present in other bacteria, by conjugation, and integron cassettes from DNA samples, by natural transformation. (Machine-translation by Google Translate, not legally binding)

Reivindicaciones

1. REIVINDICACIONES 1. Herramienta para captar casetes de integrones que incluye un sitio attl insertado en el gen de un marcador contraselectivo y el gen de la integrasa intl, donde el sitio de integración attl está insertado en el gen del marcador contraselectivo sin modificar la funcionalidad de la proteína que codifica dicho gen. 2. Herramienta para captar casetes de integrones según la reivindicación 1 en la que el sitio de integración es attl1. 3. Herramienta para captar casetes de integrones según cualquiera de las reivindicaciones anteriores en la que el gen del marcador contraselectivo es sacB. 4. Herramienta para captar casetes de integrones según la reivindicación 3 en la que el gen del marcador contraselectivo sacB está clonado con su promotor constitutivo. 5. Herramienta para captar casetes de integrones según cualquiera de las reivindicaciones 3-4 en la que el gen sacB con el sitio de integración attl insertado se corresponde con la secuencia SEQ ID NO: 18. 6. Herramienta para captar casetes de integrones según cualquiera de las reivindicaciones anteriores en la que el gen que codifica el marcador contraselectivo y tiene el sitio de integración attl insertado está incluido en el cromosoma de una bacteria hospedadora. 7. Herramienta para captar casetes de integrones según la reivindicación 6 en la que la bacteria hospedadora es una cepa de Vibrio cholerae que carece de superintegrón. 8. Herramienta para captar casetes de integrones según cualquiera de las reivindicaciones anteriores en la que el gen intl está incluido en un plásmido. 9. Herramienta para captar casetes de integrones según la reivindicación 8 que, además del gen intl, incluye el gen tfoX en el mismo plásmido. 10. Herramienta para captar casetes de integrones según la reivindicación 9 en la que el gen tfoX se corresponde con la secuencia SE ID NO: 20. 11. Herramienta para captar casetes de integrones según cualquiera de las reivindicaciones 9-10 en la que el gen tfoX está fusionado transcripcionalmente con el gen intl. 12. Herramienta para captar casetes de integrones según cualquiera de las reivindicaciones 8-11 en la que el plásmido donde está incluido el gen intl es de alto número de copias. 13. Herramienta para captar casetes de integrones según cualquiera de las reivindicaciones 8-12 en la que intl está bajo el control de un promotor inducible. 14. Herramienta para captar casetes de integrones según la reivindicación 13 en la que el promotor inducible es PBAD. 15. Bacteria hospedadora que incluye una herramienta como la descrita en cualquiera de las reivindicaciones anteriores. 16. Bacteria hospedadora de la especie Vibrio cholerae depositada con la referencia CECT31061. 17. Método de detección de casetes de integrón de una cepa bacteriana bajo estudio que incluye poner en contacto la cepa bajo estudio con la bacteria hospedadora definida en cualquiera de las reivindicaciones 15-16 en condiciones que permitan la conjugación de plásmidos de la cepa bajo estudio y la recombinación de los casetes de integrón de la cepa bajo estudio en el sitio attl de la bacteria hospedadora. 18. Método de detección de casetes de integrón en muestras de ADN que incluye poner en contacto la muestra de ADN bajo estudio con la bacteria hospedadora definida en cualquiera de las reivindicaciones 15-16 en condiciones que permitan la transformación de la bacteria hospedadora con el ADN de la muestra y la recombinación de los casetes de integrón del ADN bajo estudio en el sitio attl de la bacteria hospedadora. 19. Kit para la detección de casetes de integrón en bacterias bajo estudio que incluye cualquiera de las bacterias definidas en las reivindicaciones 15-16. 20. Kit para la detección de casetes de ¡ntegrón en bacterias bajo estudio según la reivindicación 19 en el que las bacterias hospedadoras que incluyen la herramienta de captación de casetes de ¡ntegrón son células competentes. 21. Kit para la detección de casetes de ¡ntegrón en muestras de ADN que incluye cualquiera de las bacterias definidas en las reivindicaciones 15-16.

Etiquetas

Inventores
Escudero García-Calderón José AntonioTrigo da Roza Moutinho Filipa
Solicitantes
Universidad Complutense de Madrid
Clasificacion ipc
C12N 1/ 20 A IC12N 1/ 21 A IC12N 15/ 11 A IC12N 15/ 63 A IC12N 15/ 74 A I
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