madrid2i

Resumen

The invention relates to a method for selecting peptides from proteins of tissues or organs of European hake in order to produce specific antibodies for identifying the origin of individual European hakes, assigning them to the Mediterranean basin or the Atlantic basin. Starting from the brain, peptides located in the following proteins are selected: ATP synthetase, subunit alpha; 14-3-3; and those of the voltage-dependent anion channel, respectively. The invention also relates to the combination of antibodies given the selected peptides, with which an immunodetection method has been designed in order to identify the populations of origin of the European hake. As well as the antibodies produced, the invention also relates to a kit for identifying the origin of the hakes.

Reivindicaciones

1. REIVINDICACIONES 1 . Método de selección de anticuerpos específicos de merluza europea (Merluccius merluccius) para asignar individuos a sus poblaciones según sean de origen Atlántico o de origen Mediterráneo que incluye: a) analizar la expresión de proteínas de merluza europea en tejidos u órganos de individuos procedentes del Océano Atlántico y de individuos procedentes del Mar Mediterráneo, b) seleccionar las proteínas del paso a) cuyos niveles de expresión son diferentes en los individuos procedentes del Océano Atlántico con respecto a los individuos procedentes del Mar Mediterráneo, c) identificar las proteínas seleccionadas en el paso b), d) en las proteínas identificadas en c), identificar las secuencias de aminoácidos que constituyen segmentos en α-hélice transmembrana expuestos a la matriz extracelular; e) producir anticuerpos específicos frente a las secuencias de aminoácidos identificadas en d), utilizando péptidos sintéticos. 2. Método según la reivindicación 1 en el que el órganos seleccionado para realizar el paso a) es el cerebro. 3. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 -2 en el que los péptidos del paso e) incluyen 1 o 2 aminoácidos y/o moléculas que aumentan su capacidad inmunogénica. 4. Combinación de anticuerpos específicos de merluza europea (Merluccius merluccius) para asignar individuos a sus poblaciones según sean de origen Atlántico o de origen Mediterráneo que incluye uno o más anticuerpos seleccionados según el método definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 -3. 5. Combinación de anticuerpos según la reivindicación 4 en la que uno de los anticuerpos incluidos se une específicamente a un péptido cuya secuencia de aminoácidos es SEQ ID NO: 4. 6. Combinación de anticuerpos según cualquiera de las reivindicaciones 4-5 en la que uno de los anticuerpos incluidos se une específicamente a un péptido cuya secuencia de aminoácidos es SEQ ID NO: 5. 7. Combinación de anticuerpos según cualquiera de las reivindicaciones 4-6 en la que uno de los anticuerpos incluidos se une específicamente a un péptido cuya secuencia de aminoácidos es SEQ ID NO: 6. 8. Combinación de anticuerpos según cualquiera de las reivindicaciones 4-7 en la que las secuencias de aminoácidos incluyen una cisteína en el extremo N-terminal y una molécula de hemocianina de lapa (KLH) conjugada mediante unión con maleimida. 9. Método de inmunodetección para asignar individuos de merluza europea (Merluccius merluccius) a sus poblaciones según sean de origen Atlántico o de origen Mediterráneo, que se basa en una técnica seleccionada del grupo que comprende: técnicas inmunoenzimáticas (como la técnica ELISA), de inmunofluorescencia (como la técnica de FPIA), de inmunoblot (como la técnica de Westernblot) y de aglutinación (como la técnica de DAT o FAST) o cualquier otro método basado en la detección de antígenos y que incluye la utilización de combinaciones de anticuerpos según se definen en las reivindicaciones 4-8 frente a antígenos presentes en el cerebro de los individuos de merluza europea. 10. Kit para asignar individuos de merluza europea (Merluccius merluccius) a sus poblaciones según sean de origen Atlántico o de origen Mediterráneo mediante un método según se define en la reivindicación 9, que incluye una combinación de anticuerpos según se definen en las reivindicaciones 4-8.

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