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BIOCATALYSTS AND THE APPLICATIONS THEREOFCM Patents

Índice de la ficha

Updated at
24/07/2026
Numero publicacion
WO.2014041233.A1
Fecha publicacion
20/03/2014
Numero solicitud
2013070646

En detalle

Resumen

The invention relates to the use of proteins of the viral capsid of a virus of the Potyviridae family as a substrate for the immobilisation of enzymes of interest, using a crosslinking agent suitable for joining the proteins of the viral capsid to the enzyme of interest.

Reivindicaciones

1. REIVINDICACIONES 1. Un biocatalizador que comprende - un polipéptido A que comprende una proteína de la cápsida de un virus de la familia Potyviridae, y - un polipéptido B que comprende un enzima o fragmento del mismo que conserva su actividad enzimática, en donde dicho polipéptido A está unido al polipéptido B mediante un agente de entrecruzamiento. 2. Biocatalizador según la reivindicación 1, en el que la proteína de la cápsida forma parte de un virus o de una VLP. Biocatalizador según cualquiera de las reivindicaciones 1 ó 2, en el que la proteína de la cápsida es una proteína de la cápsida de un Potyvirus. Biocatalizador según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que la proteína de la cápsida es una proteína de la cápsida del virus del mosaico del nabo (TuMV). Biocatalizador según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que el enzima es una lipasa. Biocatalizador según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que el enzima es la lipasa B de Candida antárctica. Biocatalizador según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que el agente de entrecruzamiento es glutaraldehído. 8. Biocatalizador según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, que comprende, además, al menos, un polipéptido C que comprende un enzima diferente al enzima comprendido en el polipéptido B, en donde dicho polipéptido C está unido al polipéptido A mediante un agente de entrecruzamiento, en donde dicho agente de entrecruzamiento es el mismo, o diferente al, agente de entrecruzamiento que une el polipéptido A con el polipéptido B. 9. Biocatalizador según la reivindicación 8, en el que dichos enzimas comprendidos en los polipéptidos B y C se seleccionan de modo que el producto resultante de la reacción enzimática catalizada por uno de los enzimas es el sustrato de la reacción enzimática catalizada por el otro enzima. 10. Un virus de la familia Potyviridae que comprende un polipéptido B, en donde dicho polipéptido B comprende un enzima o fragmento del mismo que conserva su actividad enzimática, unido a una proteína de la cápsida de dicho virus de la familia Potyviridae mediante un agente de entrecruzamiento. 11. Virus según la reivindicación 10, en donde el virus de la familia Potyviridae es un Potyvirus. 12. Virus según cualquiera de las reivindicaciones 10 ú 11, en el que el virus de la familia Potyviridae es el virus del mosaico del nabo (TuMV). 13. Virus según cualquiera de las reivindicaciones 10 a 12, en el que el enzima es una lipasa. 14. Virus según cualquiera de las reivindicaciones 10 a 13, en el que el enzima es la lipasa B de Candida antárctica. 15. Virus según cualquiera de las reivindicaciones 10 a 14, en el que el agente de entrecruzamiento es glutaraldehído. 16. Virus según cualquiera de las reivindicaciones 10 a 15, en el que dicho virus comprende, además, al menos, un polipéptido C que comprende un enzima diferente al enzima comprendido en el polipéptido B, en donde dicho polipéptido C está unido al víais mediante un agente de entrecruzamiento, en donde dicho agente de entrecruzamiento puede ser el mismo o diferente al agente de entrecruzamiento que une el virus con el polipéptido B. 17. Virus según la reivindicación 16, en el que dichos enzimas comprendidos en los polipéptidos B y C se seleccionan de modo que el producto resultante de la reacción enzimática catalizada por uno de los enzimas es el sustrato de la reacción enzimática catalizada por el otro enzima. 18. Una VLP de un virus de la familia Potyviridae que comprende un polipéptido B, en donde dicho polipéptido B comprende un enzima o fragmento del mismo que conserva su actividad enzimática, unido a una proteína de la cápsida de dicho virus mediante un agente de entrecruzamiento. 19. VLP según la reivindicación 18, en la que el virus de la familia Potyviridae es un Potyvirus. 20. VLP según cualquiera de las reivindicaciones 18 ó 19, en la que el virus de la familia Potyviridae es el virus del mosaico del nabo (TuMV). 21. VLP según cualquiera de las reivindicaciones 18 a 20, en la que el enzima es una lipasa. 22. VLP según cualquiera de las reivindicaciones 18 a 21, en la que el enzima es la lipasa B de Candida antárctica. 23. VLP según cualquiera de las reivindicaciones 18 a 22, en la que el agente de entrecruzamiento es glutaraldehído. 24. VLP según cualquiera de las reivindicaciones 18 a 23, que comprende, además, al menos, un polipéptido C que comprende un enzima diferente al enzima comprendido en el polipéptido B, en donde dicho polipéptido C está unido a la VLP mediante un agente de entrecruzamiento, en donde dicho agente de entrecruzamiento puede ser el mismo o diferente al agente de entrecruzamiento que une la VLP con el polipéptido B. 25. VLP según la reivindicación 24, en la que dichos enzimas comprendidos en los polipéptidos B y C se seleccionan de modo que el producto resultante de la reacción enzimática catalizada por uno de los enzimas es el sustrato de la reacción enzimática catalizada por el otro enzima. 26. Un método de obtención de un biocatalizador según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, que comprende poner en contacto un polipéptido A, que comprende una proteína de la cápsida de un virus de la familia Potyviridae, con un polipéptido B, que comprende un enzima o fragmento del mismo que conserva su actividad enzimática, en presencia de un agente de entrecruzamiento, bajo condiciones adecuadas para la formación de dicho biocatalizador. 27. Método según la reivindicación 26, que comprende (i) activar el polipéptido A con el agente de entrecruzamiento, para formar un complejo [polipéptido A - agente de entrecruzamiento], y (ii) conjugar el complejo resultante en (i) con el polipéptido B. 28. Método según la reivindicación 26, que comprende (i) activar el polipéptido B con el agente de entrecruzamiento, para formar un complejo [polipéptido B - agente de entrecruzamiento], y (ii) conjugar dicho complejo resultante en (i) con el polipéptido A. 29. Método según cualquiera de las reivindicaciones 26 a 28, en el que la proteína de la cápsida forma parte de un virus o de una VLP. 30. Un método de obtención de un virus según cualquiera de las reivindicaciones 10 a 17, que comprende poner en contacto un virus de la familia Potyviridae, con un polipéptido B, en donde dicho polipéptido B comprende un enzima o fragmento del mismo que conserva su actividad enzimática, en presencia de un agente de entrecruzamiento, bajo condiciones adecuadas para la formación de dicho virus. 31. Método según la reivindicación 30, que comprende (i) activar las proteínas de la cápsida del virus con el agente de entrecruzamiento, para formar un complejo [virus - agente de entrecruzamiento], y (ii) conjugar el complejo resultante en (i) con el polipéptido B. 32. Método según la reivindicación 30, que comprende (i) activar el polipéptido B con el agente de entrecruzamiento, para formar un complejo [polipéptido B - agente de entrecruzamiento], y (ii) conjugar dicho complejo resultante en (i) con el virus. 33. Un método de obtención de una VLP según cualquiera de las reivindicaciones 18 a 25, que comprende poner en contacto una VLP de un virus de la familia Potyviridae, con un polipéptido B, en donde dicho polipéptido B comprende un enzima o fragmento del mismo que conserva su actividad enzimática, en presencia de un agente de entrecruzamiento, bajo condiciones adecuadas para la formación de dicha VLP. 34. Método según la reivindicación 33, que comprende (i) activar la VLP con el agente de entrecruzamiento, para formar un complejo [VLP - agente de entrecruzamiento], y (ii) conjugar el complejo resultante en (i) con el polipéptido B. 35. Método según la reivindicación 33, que comprende (i) activar el polipéptido B con el agente de entrecruzamiento, para formar un complejo [polipéptido B - agente de entrecruzamiento], y (ii) conjugar dicho complejo resultante en (i) con la VLP. 36. Un método para inmovilizar un enzima que comprende conjugar un polipéptido A, que comprende una proteína de la cápsida de un virus de la familia Potyviridae, con un polipéptido B, que comprende un enzima o un fragmento del mismo que conserva su actividad enzimática, mediante un agente de entrecruzami ento . 37. Método según la reivindicación 36, en el que la proteína de la cápsida de dicho virus de la familia Potyviridae forma parte de un virus o de una VLP. 38. Método según cualquiera de las reivindicaciones 36 ó 37, que comprende (i) activar el polipéptido A con el agente de entrecruzamiento para formar un complejo [polipéptido A - agente de entrecruzamiento], y (ii) conjugar dicho complejo resultante en (i) con el polipéptido B. 39. Método según cualquiera de las reivindicaciones 36 ó 37, que comprende (i) activar el polipéptido B con el agente de entrecruzamiento para formar un complejo [polipéptido B - agente de entrecruzamiento], y (ii) conjugar dicho complejo resultante en (i) con el polipéptido A. 40. Método según cualquiera de las reivindicaciones 36 a 39, en el que el virus de la familia Potyviridae es un Potyvirus. 41. Método según cualquiera de las reivindicaciones 36 a 40, en el que virus de la familia Potyviridae es el virus del mosaico del nabo (TuMV). 42. Método según cualquiera de las reivindicaciones 36 a 41, en el que el enzima es una lipasa. 43. Método según cualquiera de las reivindicaciones 36 a 42, en el que el enzima es la lipasa B de Candida antárctica. 44. Método según cualquiera de las reivindicaciones 36 a 43, en el que el agente de entrecruzamiento es glutaraldehído. 45. Método según cualquiera de las reivindicaciones 36 a 44, que comprende, además, inmovilizar un segundo enzima, comprendiendo dicho método conjugar dicho polipéptido A, que comprende una proteína de la cápsida de un virus de la familia Potyviridae, con un polipéptido C, comprendiendo dicho polipéptido C dicho segundo enzima o un fragmento del mismo que conserva su actividad enzimática, en donde dicho segundo enzima es un enzima diferente al enzima comprendido en el polipéptido B, mediante un agente de entrecruzamiento. 46. Uso de (i) un polipéptido A que comprende una proteína de la cápsida de un virus de la familia Potyviridae, o de (ii) un virus de la familia Potyviridae, o de (iii)una VLP que comprende proteínas de la cápsida de un virus de la familia Potyviridae, para la inmovilización de un polipéptido B que comprende un enzima o fragmento del mismo que conserva su actividad enzimática. 47. Uso según la reivindicación 46, en el que el virus de la familia Potyviridae es un Potyvirus. 48. Uso según cualquiera de las reivindicaciones 46 ó 47, en el que el virus de la familia Potyviridae es el virus del mosaico del nabo (TuMV). 49. Uso según cualquiera de las reivindicaciones 46 a 48, en el que el enzima es una lipasa. 50. Uso según cualquiera de las reivindicaciones 46 a 49, en el que el enzima es la lipasa B de Candida antárctica. 51. Un procedimiento para la conversión enzimática de un sustrato en un producto que comprende poner en contacto dicho sustrato con un biocatalizador según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, o con un virus según cualquiera de las reivindicaciones 10 a 16, o con una VLP según cualquiera de las reivindicaciones 17 a 23, en donde el enzima o fragmento del mismo que conserva su actividad enzimática presente en el polipéptido B de dicho biocatalizador, o de dicho virus o de dicha VLP, es un enzima que cataliza una reacción enzimática específica para la conversión de dicho sustrato en dicho producto, bajo condiciones adecuadas para que dicha reacción enzimática tenga lugar.

Etiquetas

Inventores
Ponz Ascaso FernandoSanchez Sanchez FlorentinaMansilla Mansilla Maria del CarmenCuenca Martin Maria del SolAguado Alonso MartaSanchez Montero Jose Maria
Solicitantes
Inst Nac Investigacion IniaUniversidad Complutense de MadridInstituto Nacional de Investigacion y Tecnologia Agraria y Alimentaria - Inia
Clasificacion ipc
C12N 11/ 06 A I
Publicaciones
WO.2014041233.A1
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