Resumen
Screening for the diagnosis of Alzheimer's disease based on the detection of β-amyloid by FRET in plasma. Alzheimer's disease (AD) is the leading cause of dementia worldwide. Therefore, the search for biomarkers and the development of methodologies that allow for its early detection constitute a health and economic challenge. The concentrations of beta-amyloid Aβ 40 and AβThe presence of 42 Aβ oligomers in the cerebrospinal fluid and blood of Alzheimer's patients constitutes a good prognostic biomarker. Currently, Aβ oligomers with abnormal conformation can be detected using an ELISA-type immunoassay, or early detection of Aβ oligomerization can be achieved using an infrared immunosensor. A method based on fluorescence energy transfer resonance is proposed, employing a FRET (fluorescence energy transfer) pair consisting of compound A with general formula I and compound B CRANAD-2. (Machine-translation by Google Translate, not legally binding)
Reivindicaciones
1. REIVINDICACIONES 1. Compuestos derivados de difluorodioxaborinino y estirilquinolina de fórmula I, <img class="EMIRef" id="b3c69693-f68a-4923-90e2-c58ae11929ce-imgf000020-0002" /> donde R1 es un sustituyente alquilo o anillos aromáticos, carbocíclicos o heterocíclicos; R2, R3 y R4 son H, OH, O-alquilo, O-arilo, SH, S-alquilo, S-arilo, NH2, NH-alquilo, NH-arilo o un halógeno (F, Cl, Br o I); R5 y R6 son H, cadenas alquílicas o arílicas, anillos aromáticos, heterociclos, o formar parte de un mismo heterociclo; y n varía entre 0 y 1. 2. Compuestos, según reivindicación 1, donde R2, R3 y R4 son hidrógeno y R1, R5 y R6 son metilo. 3. Compuestos, según reivindicación 1, donde R1 es metilo; R2, R3 y R4 son hidrógeno; y R5 y R6 son metilo o forman pirrolidina. 4. Compuestos, según reivindicaciones 2 y 3, de fórmulas A-1, A-2, A-3 y A-4 <img class="EMIRef" id="b3c69693-f68a-4923-90e2-c58ae11929ce-imgf000020-0001" /> 5. Método de preparación de los compuestos de fórmula I, según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, a partir de un compuesto de fórmula general II que comprende: - Añadir sobre el compuesto de fórmula II trifluoruro de boro dietil eterato y tolueno anhidro - Agitar la muestra a temperatura ambiente - Lavar el residuo sólido con éter etílico anhidro y disolver el precipitado oscuro en CH2Ch - Lavar con agua la fase orgánica - Realizar una evaporación a presión reducida para obtener un compuesto de fórmula general I en forma de sólido de color negro <img class="EMIRef" id="b3c69693-f68a-4923-90e2-c58ae11929ce-imgf000021-0002" /> 6. Par FRET (fluorescencia por transferencia de energía) formado por un compuestoAde fórmula general I y el compuesto de fórmulaB. <img class="EMIRef" id="b3c69693-f68a-4923-90e2-c58ae11929ce-imgf000021-0001" /> 7. Par FRET formado, según reivindicaciones 4 y 6, donde el compuestoAse elige entre los compuestos de fórmula I por un compuesto de fórmula A-1, A-2, A-3 o A-4. 8. Par FRET, según reivindicación 7, donde el compuestoAes el compuesto A-3. 9. Uso del par FRET, según reivindicación 6, para la detección de agregados Aβ40 y Aβ42 con plegamiento anómaloin vitroen muestras de plasma humano enriquecido con proteínas amiloides. 10. Uso del par FRET, según reivindicaciones 8 y 9, para la detección de agregados Ap40en concentraciones comprendidas en un rango entre 0 y 120 nM con un límite de detección superior 12 nM y un límite de cuantificación superior a 42 nM. 11. Uso del par FRET, según reivindicaciones 8 y 9, para la detección de agregados Aβ42 en concentraciones comprendidas en un rango entre 0 y 120 nM con un límite de detección superior 22 nM y un límite de cuantificación superior a 74 nM.
