A Asperguillus fumigatusAspfl low-allergy protein variant comprising a low-cytotoxicity product similar in capacity to material fungic proteins, is new. Also claimed is a process using the variant, comprising cloning and expressing the recombinant DNA codifying the product for use in diagnosis and therapy. The recombinant mutant protein is expressed in the E. coli procariot, for purification.
1. 1. Moléculas de DNA recombinantecaracterizadas por SEQ ID NO: 1 que codifican péptidos conactividad ribonucleolítica y que poseen al menos un epítopoalergénico común con el alergeno principal de Aspergillusspp. denominado Aspf1. 2. 2. Moléculas de DNA recombinantecaracterizadas por SEQ ID NO: 1 que codifican péptidos conpropiedades citotóxicas y/o alergénicas atenuadas. 3. 3. Moléculas de DNA recombinantecaracterizadas por SEQ ID NO: 1 que codifican péptidos concapacidad alterada, con respecto a laα-sarcina y Aspf1, para interaccionar conmembranas lipídicas. 4. 4. Moléculas de DNA recombinante, segúnreivindicaciones anteriores, o modificaciones de dichas moléculas, que codifican polipéptidos unidos a un polipéptido adicional, omodificados química o enzimáticamente. 5. 5. Polipéptidos recombinantes deΔ (6-21) Aspf1, o fragmentos dedichos polipéptidos, según reivindicaciones anteriores, caracterizados por la secuencia dada en SEQ ID NO: 1 y 2, que presentan la antigenicidad de, al menos, un epítopo deAspf1. 6. 6. Polipéptidos recombinantes deΔ (6-21) Aspf1, o fragmentos dedichos polipéptidos, según reivindicaciones 1, 2, 3 y 4, caracterizados por la secuencia dada en SEQ ID NO: 1 y 2, que presentan actividad ribonucleolítica alterada con respecto a laα-sarcina, las Aspf1 y la RNasa U2. 7. 7. Polipéptidos recombinantes deΔ (6-21) Aspf1, o fragmentos dedichos polipéptidos, según reivindicaciones 1, 2, 3 y 4, caracterizados por la secuencia dada en SEQ ID NO: 1 y 2, que presentan actividad citotóxica alterada con respecto a laα-sarcina, las Aspf1 y la RNasa U2. 8. 8. Polipéptidos recombinantes deΔ (6-21) Aspf1, o fragmentos dedichos polipéptidos, según reivindicaciones 1, 2, 3 y 4, caracterizados por la secuencia dada en SEQ ID NO: 1 y 2, que presentan una capacidad alterada para interaccionar conmembranas con respecto a la α-sarcina, laAspf1 y la RNasa U2. 9. 9. Un vector de expresión procariota, ypreferentemente pINPG o pET, que contenga cualquiera de lassecuencias de nucleótidos descritas en las reivindicaciones 1 a 4, yque permita la producción recombinante de cualquiera de lospolipéptidos según reivindicaciones 5 a 8. 10. 10. Un vector de expresión eucariota, ypreferentemente pHILD2, pHILS1, pPIC9 o pPICZα, que contengacualquiera de las secuencias de nucleótidos descritas en lasreivindicaciones 1 a 4, y que permita la producción recombinante decualquiera de los polipéptidos según reivindicaciones 5 a 8. 11. 11. Un organismo hospedador procariota, transformado con un vector según reivindicación 9. 12. 12. Un organismo hospedador eucariota, transformado con un vector según reivindicación 10. 13. 13. Un método para producir polipéptidosrecombinantes, según reivindicaciones 5, 6, 7, 8, 9 y 11, en elsistema procariota de bacteria Escherichia coli ypreferentemente de la cepa BL21 (DE3) , caracterizadoporque se realiza una purificación mediante una cromatografía deintercambio iónico en Amberlita IRC-50 y una depenetrabilidad en Biogel P10. 14. 14. Un método para producir polipéptidosrecombinantes, según reivindicaciones 5, 6, 7, 8, 10 y 12, en elsistema eucariota de levadura Pichia pastoris ypreferentemente de las cepas GS115 y KM71, caracterizadoporque se realiza una purificación mediante una cromatografía deintercambio iónico en Amberlita IRC-50 y una depenetrabilidad en Biogel P10. 15. 15. Utilización de los polipéptidos, segúnreivindicaciones 5-8, en el diagnóstico invitro de la alergia. 16. 16. Aplicación de las moléculas recombinantes, según reivindicaciones 1-4, para el diseño devacunas destinadas a la inmunoterapia de la alergia. 17. 17. Aplicación de las moléculas recombinantessegún reivindicaciones 1-4 para producir péptidosque contengan al menos un epítopo T del alergeno Aspfl y seancapaces de actuar como vacunas. 18. 18. Aplicación de las moléculas recombinantes, según reivindicaciones 1-4, para la producción deisoformas recombinantes hipoalergénicas que tengan disminuida oanulada su unión a IgE para el tratamiento de alergias. 19. 19. Aplicación de las moléculas recombinantes, según reivindicaciones 1-4, para la producción depolipéptidos recombinantes con citotoxicidad modificada.