Reivindicaciones
REIVINDICACIONES 1.-Procedimiento modulador de la activacion de los linfocitos T caracterizado porque se basa en la regulación de la interacción proteina-proteina de CD3F,-Nck. 2. -Procedimiento modulador de la activación de los linfocitos T begun la reivindicación 1 caracterizado porque se usan sustancias quimicas que alteran dicha interacción mediante su inhibition (antagonistas). 3. -Procedimiento modulador de la activación de los linfocitos T begun la reivindicación 1 caracterizado porque se usan sustancias quimicas que alteran dicha interacción mediante su activation (agonistas). 4. -Procedimiento modulador de la activation de los linfocitos T begun una cualquiera de las reivindicaciones 2 y 3 caracterizado porque dichas sustancias agonistas o antagonistas se identifican con un método que comprende los siguientes pasos: a) generar una preparación biologica de la interacción proteina-proteina que mimetize la interacción CD3#-Nck, b) anadir la sustancia quimica candidata a agonista 6 antagonista, y c) determinar el bloqueo o activación de la interaccion proteina-proteina CD3e-Nck, identificandose en caso de bloqueo un antagonista de la interacción CD3s-Nck y en caso de activation un agonista de la interacción CD3-Nck. 5. -Procedimiento modulador de la activación de los linfocitos T begun la reivindicación 4 caracterizado porque la preparción biologica de la interaccion proteina-proteina de CD3- Nck se realiza utilizando las proteins CD3 y Nck humanas, sus formas homologuas o peptids (fragmentos) que mimetizan la actividad biológica de dichas proteins o sus formas homologas. 6. -Procedimiento modulador de la activación de los linfocitos T begun la reivindicación 4 6 5 caracterizado porque el peptido que mimetiza la actividad biológica de NcK de union a CD3 comprende la secuencia de aminoácidos del dominio SH3.1 de NcKp (SEQ ID N02). 7. -Procedimiento modulador de la activación de los linfocitos T begun la reivindicación 4 6 5 caracterizado porque el peptido que mimetiza la actividad biológica de NcK de union a CD3 comprende la secuencia de aminoácidos del dominio SH3.1 de NcKa (SEQ ID N03). <Desc/Clms Page number 33> 8.-Procedimiento modulador de la activation de los linfocitos T segun la reivindicación 4 6 5 caracterizado porque ex peptid que mimetiza la actividad biológica de CD3 de union a Nck comprende la secuencia de aminoácidos de a region rica de prolinas (PRS) de CD3 (SEQ ID NO1). 9. -Procedimiento modulador de la activation de los linfocitos T begun una cualquiera de las reivindicaciones 4 a la 8 caracterizado porque la secuencia de aminoácidos de las proteins CD3 y Nck humanas, sus formas homologuas o peptids (fragmentos) que mimetizan la actividad biológica de dichas proteins o sus formas homologuas esta contenida en una proteina de fusion. 10. -Procedimiento modulador de la activation de los linfocitos T begun la reivindicación 9 caracterizado porque la proteina de fusion es, entre otras, GST-SH3.1, SH3.1-EGFP, Nck- EGFP y HA-Nck. 11. 11.- Procedimiento modulador de la activaci6n de los linfocitos T begun una cualquiera de las reivindicaciones 4 a la 10 caracterizado porque las proteins CD3 y Nck humanas, sus formas homologuas o peptids (fragmentos) que mimetizan la actividad biológica de dichas proteins o sus formas homologuas provienen de lisados celulares o a partir de preparaciones de proteins purificadas o semipurificadas. 12.-Procedimiento modulador de la activation de los linfocitos T begun una cualquiera de las reivindicaciones 4 a la 11 caracterizado porque la preparación biológica de la interacción proteina-proteina de CD3s-Nck se realiza en un entorno libre de celulas. 13. -Procedimiento modulador de la activación de los linfocitos T la reivindicación 12 caracterizado porque el entorno libre de células es, entre otras posibilidades, un ensayo de inmunoprecipitación y un ensayo de estimulación del TCR purificado. 14. -Procedimiento modulador de la actiación de los linfocitos T begun una cualquiera de las reivindicaciones 4 a la 13 caracterizado porque los complejos proteina-proteina que mimetizan la interacción CD3E-Nck son identificados, entre otras posibilidades, por técnicas inmunologicas. 15. -Procedimiento modulador de la activación de los linfocitos T segun una cualquiera de las reivindicaciones 4 a la 11 caracterizado porque la prepación biológica de la interacción proteina-proteina de CD3s-Nck se realiza en un entorno celular, entre otras posibilidades, un ensayo funcional de cuantificacion de extension y despliegue celular, un ensayo funcional de cuantificacion de secretion de citoquinas (IL-2 y TNFα), un ensayo funcional <Desc/Clms Page number 34> de cuantificacion de la proliferación celular, un ensayo fucional de cuantificacion de la formación de conjugados entre linfocitos T y células APC, un ensayo funcional de cuantificacion de la maduración de la IS y un ensayo de dos hibridos (trap assay). 16. -Procedimiento modulador de la activation de los linfocitos T begun una cualquiera de las reivindicaciones 4 a la 15 caracterizado porque la preparacion biologica de la interacción proteina-proteina de CD3s-Nck y la determinación del bloqueo o activation de dicha interacción tras la adición de un candidato agonista o antagonista se realiza en una situación basal o de control, de estimulación (anti-CD3 y células APC cargadas con superantigeno 6 antigeno, entre otros) o de bloqueo (sobreexpresión de SH3.1 de Nck y transducción del anticuerpo APA1/1, entre otros) de dicha interaccion segun el interns en identificar uno u otro agente. 17. -Procedimiento modulador de la activation de los linfocitos T begun una cualquiera de las reivindicaciones 2 a la 16 caracterizado porque las sustancias quimicas candidatas a ser probadas como moduladores de la interacción CD3s-Nek pueden ser producidos, por ejemplo, por bacterias, levaduras y otros microorganismos (productos naturales), producidos quimicamente (por ejemplo, moléculas de pequeno tama o incluyendo peptidomiméticos), o producidos por ingenieria genetic. 18. -Procedimiento modulador de la activation de los linfocitos T begun la reïvindicación 1 caracterizado porque consiste en un tratamiento de terapia genica que permite la regulation de la interacción proteina-proteina de CD3 y Nck. 19. -Procedimiento modulador de la activation de los linfocitos T begun la reivindicación 18 caracterizado porque la regulation es un bloqueo de la interacción CD3e-Nck que se realiza, entre otras posibilidades, mediante la sobreexpresión del dominio SH3.1 de Nck o por transducción con un anticuerpo especifico (APA1/1). 20. -Procedimiento modulador de la activación de los linfocitos T begun una cualquiera de las reivindicaciones 1-2 y de la 4 a la 19 caracterizado porque forma parte de un protocolo de tratamiento enfermedades que cursan con una activación patológica de los linfocitos T como son, entre otras, enfermedades autoinmunes como la artritis reumatoide, lupus eritematoso, esclerosis multiple, diabetes tipo I y miastenia gravis; enfermedades de tipo alergico ; en la prevencion y en el tratamiento del rechazo de transplantes y linfomas de linfocitos T. <Desc/Clms Page number 35> 21.-Procedimiento modulador de la activation de los linfocitos T begun una cualquiera de las reivindicaciones 1 y de la 3 a la 18 caracterizado porque forma parte de un protocolo de tratamiento de enfermedades que cursan con una inhibition de los linfocitos T como son, entre otras, enfermedades infecciosas, bacterianas y virales entre otras, y tumorales. 22. -Secuencia de nucleótidos (DNA, RNA o cDNA) codificantes de proteins CD3 y Nck humanas, sus formas homologuas o peptids (fragmentos) que mimetizan la actividad biologica de dichas proteins o sus formas homologuas caracterizada porque forma parte de un procedimiento begun una cualquiera de las reivindicaciones 1 a la 21. 23. -Vector de expresión caracterizado porque contiene una secuencia de nucleótidos segun la reivindicación 22. 24.-Celula huésped caracterizada porque contiene un vector de expression segun la reivindicación 23.