Resumen
Detection of in vitro bioequivalence between the formulations of a generic drug with respect to a reference drug. The in vitro bioequivalence studies that some drugs currently require are expensive, require specialized personnel, and have to be carried out in humans. The present invention proposes a method to determine bioequivalence in vitro that is based on the LIBS emission spectrochemical study of the chemical elements that make up the formulation of both drugs (generic and reference drug) combined with a statistical procedure. The method allows the determination of bioequivalence between drugs with high precision, providing results of high sensitivity and specificity with convenient speed and without the requirement of advanced analytical instrumentation. (Machine-translation by Google Translate, not legally binding)
Reivindicaciones
1. REIVINDICACIONES 1. Método de detección de la bioequivalenciain vitroentre las formulaciones de un fármaco genérico con respecto a un fármaco de referencia que comprende las siguientes etapas: (a) Preparar tabletas homogéneas de fármaco genérico y de referencia. (b) Irradiar tabletas de cada uno de los fármacos anteriores con un láser focalizado sobre la superficie de la misma obteniendo un plasma de dicha muestra. (c) Obtener espectros del plasma de las muestras de comprimido (fármaco genérico y de referencia). (d) Determinar las intensidades de emisión para cada una de las longitudes de onda que comprenden el espectro LIBS de las muestras. (e) Analizar los espectros estadísticamente calculando los factores f1 (diferenciación) y f2 (similitud) entre el espectro medio del fármaco genérico con respecto al espectro medio del fármaco de referencia. (f) Evaluar la bioequivalencia del medicamento genérico, con respecto al fármaco de referencia, en función de los valores obtenidos de f1 y f2 y su criterio de evaluación: 0% < f1 < 15% y 50% < f2 < 100%. 2. Método de detección de la bioequivalenciain vitroentre las formulaciones de un fármaco genérico con respecto a un fármaco de referencia, según reivindicación 1, donde la preparación de tabletas homogéneas de fármaco genérico y fármaco de referencia comprende: - Determinar la masa media de entre 1 y 100 tabletas, tanto del fármaco de referencia como del genérico - Pulverizar las tabletas - Homogeneizar el tamaño del fármaco pulverizado - Preparar nuevas tabletas a partir del polvo, con una masa igual a la masa media de las tabletas originales. 3. Método de detección de la bioequivalenciain vitroentre las formulaciones de un fármaco genérico con respecto a un fármaco de referencia, según reivindicación 2, donde las tabletas se pulverizan con un mortero de porcelana, se homogenizan en un molino eléctrico y, posteriormente, se hace pasar el polvo por una malla de 0,2 mm. 4.Método de detección de la bioequivalenciain vitroentre las formulaciones de un fármaco genérico con respecto a un fármaco de referencia, según reivindicación 1, donde se obtienen entre 10 y 100 espectros de cada muestra mediante espectroscopia de ablación inducida por láser (LIBS). 5. Método de detección de la bioequivalenciain vitroentre las formulaciones de un fármaco genérico con respecto a un fármaco de referencia, según reivindicación 4, donde el láser focalizado que irradia las muestras de fármacos es un láser de estado sólido, líquido o gaseoso que emite radiación electromagnética ultravioleta visible o infrarroja y produce un plasma del material ablacionado. 6. Método de detección de la bioequivalenciain vitroentre las formulaciones de un fármaco genérico con respecto a un fármaco de referencia, según reivindicación 5, donde el láser es un láser de cualquier tipo que trabaja a una frecuencia de 1 Hertz a 100 kHz a una longitud onda adecuada para la formación de un plasma. 7. Método de detección de la bioequivalenciain vitroentre las formulaciones de un fármaco genérico con respecto a un fármaco de referencia, según reivindicaciones 4 y 5, donde los espectros LIBS se obtienen en un sistema compone de un láser pulsado (1), espejos (2), lentes (3), posicionador muestra (4), fibra óptica (5), espectrómetro-detector (6), y ordenador personal o Tablet (7). 8. Método de detección de la bioequivalenciain vitroentre las formulaciones de un fármaco genérico con respecto a un fármaco de referencia, según reivindicaciones 4 a 6, donde se emplea un láser de Nd:YAG que trabaja a una frecuencia de 1 a 20 Hertz a una longitud de onda fija de 1064 nm y proporciona una energía de salida de hasta 180 mJ/pulso durante4ns, con un tiempo de retraso de ps entre el pulso láser y la obtención del espectro en la evolución del plasma. 9. Método de detección de la bioequivalenciain vitroentre las formulaciones de un fármaco genérico con respecto a un fármaco de referencia según reivindicación 1, caracterizado porque la detección de la radiación producida por los elementos químicos del plasma es un sistema óptico. 10. Método de detección de la bioequivalenciain vitroentre las formulaciones de un fármaco genérico con respecto a un fármaco de referencia, según reivindicación 9, donde el detector óptico es un sensor óptico CCD (Charge-Coupled Device)que proporciona 7296 puntos espectrales en el rango de180 a 960 nm. 11. Método de detección de la bioequivalenciain vitroentre las formulaciones de un fármaco genérico con respecto a un fármaco de referencia, según reivindicación 1, donde el análisis estadístico de los espectros obtenidos se realiza determinando el coeficiente de correlación de Pearson y Spearman entre los espectros y el espectro medio. 12. Método de detección de la bioequivalenciain vitroentre las formulaciones de un fármaco genérico con respecto a un fármaco de referencia, según reivindicación 1, donde los factores estadísticos de diferenciación (f1) y similitud (f2) vienen definidos por: <img class="EMIRef" id="ef6554a9-631a-4ee3-bfe9-3e2427e9702d-imgf000015-0001" /> donde R¡ se refiere a la intensidad para una longitud de onda dada del espectro del fármaco de referencia; T¡ es la intensidad para la misma longitud de onda del espectro del fármaco genérico; y n se refiere al número total de longitudes de onda para la que existe una intensidad en el espectro del fármaco o a el número de pares de datos (longitud de onda, intensidad) con que cuentan los espectros. 13. Método de detección de la bioequivalenciain vitroentre las formulaciones de un fármaco genérico con respecto a un fármaco de referencia, según reivindicaciones 1 y 12, donde la determinación de la bioequivalenciain vitrode la formulación de un medicamento genérico con respecto a un medicamento de referencia se realiza mediante un procedimiento convencional de análisis de los factores estadísticos de diferenciación (f1) y similitud (f2). 14. Método de detección de la bioequivalenciain vitroentre las formulaciones de un fármaco genérico con respecto a un fármaco de referencia, según reivindicación 1, donde las muestras de medicamentos son formulaciones de tabletas sólidas, con o sin recubrimiento, de principios activos que pueden corresponder a cualquier categoría del sistema de clasificación biofarmacéutico. 15. Método de detección de la bioequivalenciain vitroentre las formulaciones de un fármaco genérico con respecto a un fármaco de referencia, según reivindicación 1, donde las muestras de medicamentos son formulaciones de tabletas sólidas, con o sin recubrimiento, de principios activos que pueden corresponder a cualquier categoría del sistema de clasificación biofarmacéutico sin excepciones relacionadas con la concentración del principio activo en la formulación y/o dosificación.
