Resumen
The present invention relates to an animal model of human angiogenesis for the quantitative and non-invasive monitoring of said process of angiogenesis in vivo by molecular imaging, in particular, by bioluminescence imaging. In particular, the inventors have observed that when endothelial cells are inoculated in a non-human animal together with primary mesenchymal stem cells, said endothelial cells have the ability to form a network of blood vessels in said animal. Also, the invention relates to the use of said models of angiogenesis to achieve the secretion into the bloodstream of proteins of therapeutic interest. (Machine-translation by Google Translate, not legally binding)
Reivindicaciones
1. 1. Una composición o kit que comprende, juntas oseparadas, células endoteliales y células madre mesenquimalesprimarias. 2. 2. Composición o kit según la reivindicación 1donde dichas células endoteliales son células endotelialesprimarias. 3. 3. Composición o kit según la reivindicación 2donde dichas células endoteliales primarias son célulashumanas. 4. 4. Composición o kit según cualquiera de lasreivindicaciones 1 a 3 en donde dichas células endotelialesprimarias son de vena de cordón umbilical. 5. 5. Composición según cualquiera de lasreivindicaciones 1 a 4, donde dichas células madre mesenquimalesprimarias son humanas. 6. 6. Composición según la reivindicación 5, dondedichas células madre mesenquimales primarias son de médulaósea. 7. 7. Composición según la reivindicación 6, dondedichas células madre mesenquimales primarias son positivas para losmarcadores de superficie celular CD13, CD73 y CD90 y negativas paralos marcadores de superficie celular CD34, CD14 y CD45. 8. 8. Composición según cualquiera de lasreivindicaciones 1 a 7, donde dichas células endoteliales y célulasmadre mesenquimales primarias están incluidas en una matriz. 9. 9. Composición según la reivindicación 8, dondedicha matriz es una matriz extracelular de membrana basal desarcoma de ratón. 10. 10. Composición o kit según cualquiera de lasreivindicación 1 a 9, donde dichas células endoteliales estángenéticamente modificadas. 11. 11. Composición o kit según la reivindicación10, donde dichas modificación genética comprende la presencia de endichas células de una secuencia de nucleótidos que codifica para ungen reportero. 12. 12. Composición o kit según la reivindicación11, donde dicho gen reportero se selecciona del grupo del gen de laluciferasa y el gen de una proteína fluorescente. 13. 13. Composición o kit según la reivindicación10, donde dichas modificación genética comprende la presencia endichas células de una secuencia de nucleótidos que codifica para ungen terapéutico. 14. 14. Composición o kit la reivindicación 13 endonde el gen terapéutico es un gen que codifica un anticuerpo. 15. 15. Composición o kit según la reivindicación 14en donde el anticuerpo es un anticuerpo biespecífico. 16. 16. Composición o kit según la reivindicación 15en donde el anticuerpo biespecífico contiene un dominio que se uneespecíficamente a un ligando específico de tumores y un segundodominio que se une a un antígeno de superficie de células T. 17. 17. Composición o kit según la reivindicación 16en donde el antígeno específico de células tumorales es CEA y/o elantígeno de superficie de células T es CD3. 18. 18. Composición o kit según las reivindicaciones16 ó 17 que comprende, adicionalmente, células mononucleares desangre periférica activadas. 19. 19. Uso de una composición o kit segúncualquiera de las reivindicaciones 1 a 18, para promover laangiogénesis en un animal. 20. 20. Un procedimiento para obtener un modeloanimal de angiogénesis que comprende inocular subcutáneamente a unanimal no humano una composición según cualquiera de lasreivindicaciones 1 a 18. 21. 21. Procedimiento según la reivindicación 20, que comprende, además, mantener dicho animal en las condicionesadecuadas de crecimiento para la formación de una red capilar apartir del inóculo subcutáneo. 22. 22. Un animal no humano obtenido según elprocedimiento de las reivindicaciones 20 ó 21. 23. 23. Uso de un animal según la reivindicación 22para el estudio de la angiogénesis. 24. 24. Uso de la composición o kit según unacualquiera de las reivindicaciones 1 a 18 para promover laangiogénesis. 25. 25. Uso de la composición según lasreivindicaciones 11 ó 12 para la detección de la angiogénesis. 26. 26. Método in vivo para la identificaciónde reguladores del proceso de angiogénesis que comprende: 27. iii) 28. iv) 29. en donde el compuesto ensayado es identificadocomo regulador de dicho proceso de angiogénesis si provoca unavariación en la expresión del gen reportero con respecto a de losniveles de expresión de dicho gen reportero en ausencia de dichocompuesto. 30. 27. Método según la reivindicación 26, dondedicho compuesto es identificado como activador del proceso deangiogénesis, si provoca un aumento en la expresión del genreportero con respecto a los niveles de expresión de dicho genreportero en ausencia de dicho compuesto. 31. 28. Método según la reivindicación 26, dondedicho compuesto es identificado como inhibidor del proceso deangiogénesis, si provoca una disminución en la expresión del genreportero con respecto a de los niveles de expresión de dicho genreportero en ausencia de dicho compuesto. 32. 29. Método según cualquiera de lasreivindicación 25 a 28 en donde dicha detección se realiza invitro por microscopía a partir de una preparación de tejido queexpresa dicho gen reportero. 33. 30. Método según la reivindicación 25 a 28 dondedicho gen reportero es el gen de la GFP. 34. 31. Método según cualquiera de lasreivindicaciones 25 a 30 donde dicha detección se realiza invivo en un ratón provisto de ventanas transparentes. 35. 32. Método según cualquiera de lasreivindicaciones 25 a 28 en donde dicho gen reportero es el gen dela luciferasa. 36. 33. Método según la reivindicación 32, dondedicha detección se realiza in vivo por detección debioluminiscencia. 37. 34. Método según la reivindicación 33, dondedicha detección se realiza mediante la medida del número de fotonesemitidos. 38. 35. Método según cualquiera de lasreivindicaciones 25 a 34 en donde dicha detección se realizamediante la visualización del tejido que expresa dicho genreportero. 39. 36. Uso de una composición o kit segúncualquiera de las reivindicaciones 13 a 18 para la fabricación deun medicamento para el tratamiento de una enfermedad que requierade la expresión de dicho gen terapéutico. 40. 37. Uso de una composición o kit segúncualquiera de las reivindicaciones 16 a 18 para la fabricación deun medicamento para el tratamiento del cáncer.
