madrid2i

Resumen

Strain of the yeast saccharomyces cerevisiae and method for the detection of antifungal substances with activity on the cell wall. In the present invention the development and use of a genetically modified strain of the yeast saccharomyces cerevisiae is presented, as a biological system aimed at the identification of substances capable of interfering with the processes of construction and/or maintenance of the integrity of the wall cellular of said organism. Likewise, a screening/tracing method of said substances using the aforementioned control/indicator line is presented. (Machine-translation by Google Translate, not legally binding)

Reivindicaciones

1. 1. Estirpe de la levadura Saccharomycescerevisiae para la detección de sustancias antifúngicas conactividad directa o indirecta sobre la pared celularcaracterizada porque el gen YKL161C está reemplazado por ungen marcador que queda bajo el control del promotor del gen YKL161Cque ha sido sustituido. 2. 2. Estirpe de la levadura Saccharomycescerevisiae para la detección de sustancias antifúngicas, segúnla reivindicación 1, caracterizada porque el gen marcadorque reemplaza al gen YKL161C confiere resistencia a unantibiótico. 3. 3. Estirpe de la levadura Saccharomycescerevisiae para la detección de sustancias antifúngicas, segúnla reivindicación 2, caracterizada porque el gen marcadorconfiere resistencia al antibiótico nourseotricina. 4. 4. Estirpe de la levadura Saccharomycescerevisiae para la detección de sustancias antifúngicas, segúncualquiera de las reivindicaciones 2 y 3, caracterizadaporque, en medios de cultivo que incluyen el antibiótico marcador, aumenta su capacidad de crecimiento en presencia de agentes queperturban la estabilidad de la pared celular de la levaduraincluyendo los agentes que alteran la estructura de la pared, losque degradan sus componentes y/o los que inhiben la síntesis dealguno de dichos componentes. 5. 5. Estirpe de la levadura Saccharomycescerevisiae para la detección de sustancias antifúngicas, segúncualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizadaporque expresa de forma constitutiva un gen que permite ladiferenciación entre la estirpe modificada genéticamente y laestirpe silvestre de la que deriva. 6. 6. Estirpe de la levadura Saccharomycescerevisiae para la detección de sustancias antifúngicas, segúnreivindicación 5, caracterizada porque el gen cuya expresiónconstitutiva permite la diferenciación entre la estirpe modificadagenéticamente y la estirpe silvestre de la que deriva es el gen HISSde Schizosaccharomyces pombe. 7. 7. Cultivo biológicamente puro de la levaduraSaccharomyces cerevisiae CECT 12033. 8. 8. Vector plasmídico para la detección desustancias antifúngicas con actividad directa o indirecta sobre lapared celular caracterizado porque contiene un gen marcadorde resistencia a un antibiótico bajo el control del promotor del genYKL161C de Saccharomyces cerevisiae, y el gen HIS5 deSchizosaccharomyces pombe situado a continuación del genmarcador. 9. 9. Vector plasmídico para la detección desustancias antifúngicas con actividad directa o indirecta sobre lapared celular, según la reivindicación 8, caracterizadoporque el gen marcador que contiene confiere resistencia alantibiótico nourseotricina. 10. 10. Método para la detección de sustanciasantifúngicas con actividad directa o indirecta sobre la paredcelular que comprende: 11. 11. Método para la detección de sustanciasantifúngicas, según la reivindicación 10, que incluye en el paso b.la presencia del sustrato del gen marcador. 12. 12. Método para la detección de sustanciasantifúngicas, según la reivindicación 11, que incluye en el paso b.concentraciones del antibiótico marcador superiores a laconcentración mínima inhibitoria. 13. 13. Método para la detección de sustanciasantifúngicas, según la reivindicación 12, donde el antibióticomarcador es la nourseotricina. 14. 14. Método según la reivindicación 13 donde laestirpe utilizada es Saccharomyces cerevisiae CECT12033.

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